"Dünnschichtchromatographie" - Blattfarbstoffe / Metallchelate 1. Theorie NP/RP-Methoden: NP: Diese Art der Chromatographie nennt man Normal-Phase-Chromatographie. Die Charakteristische Eigenschaft dieser NPC ist eine polare stationäre (Kieselgel bzw. Aluminiumoxid) und eine unpolare bis mäßig polare mobile Phase(z. B. Gemisch aus CCl4 und CHCl3). Das Trennprinzip beruht auf der Adsorption der Stoffe, wobei nicht nur die Analyten, sondern auch die polaren LöMi-Moleküle adsorbiert werden, und dabei die Analyten von ihren Adsorptionsplätzen verdrängen können (eluieren). Die möglichen mobilen Phasen sind in einer sog. Eluotropen Reihe, nach ihrer Elutionskraft angeordnet. Dünnschichtchromatographie · Prinzip & Auswertung · [mit Video]. Wasser steht in dieser Reihe weit oben und ist somit für die NPC eher schlecht geeignet, da es aufgrund seiner hohen Polarität, zu viele Adsorptionsplätze besetzen würde. RP: Die sog. Reversed-Phase-Chromatographie funktioniert genau umgekehrt, hier ist die Stationäre Phase unpolar und die mobile Phase eher polar. Das Trennprinzip hier beruht i. d.
Diesen Standard muss man parallel auf einer anderen Folie ermitteln. Dadurch hat man einen weiteren Wert, den man zur Identifikation heranziehen kann. Unterschied zwischen Dünnschichtchromatographie und Säulenchromatographie Die Säulenchromatographie beruht auf den gleichen Trennprinzipien wie die Dünnschichtchromatographie, nur ist hier der Aufbau, wie der Name schon sagt, in einer Säule verpackt. Dünnschichtchromatographie blattfarbstoffe rf west palm beach. Diese ist gefüllt mit einem Packungsmaterial, das hier dieselbe Funktion erfüllt wie die Sorbensschicht bei der Dünnschichtchromatographie. Hierbei wird aber die Bewegung der mobilen Phase nach oben nicht durch Kapillarkräfte erzeugt, sondern mit Druckluft durch die stationäre Phase gepresst. Dadurch lässt sich die Fließgeschwindigkeit frei einstellen, was eine bessere Reproduzierbarkeit der Ergebnisse ermöglicht. Außerdem misst man in der Säulenchromatographie nicht die zurückgelegte Wegstrecke, sondern die Zeit, die die einzelnen Bestandteile brauchen, um das gesamte Packungsmaterial zu durchqueren.
Dieser Transmissionswert wird mit Hilfe einer, vorher erstellten, Kalibriergerade einer Stammlösung bekannter Konzentration, in den Carotingehalt des Extraktes umgerechnet. Herstellung der Chelate: Die Lösungen der zu bestimmenden Ionen werden mit 1ml Natrium-Diethylcarbaminat-Lösung versetzt. Die ausgefallenen Komplexe werden mit Chloroform im Scheidetrichter extrahiert, und in verschließbare Gläschen überführt. Experiment: Dünnschicht-Chromatographie (DC) der Blattfarbstoffe. Trennung: Analog der Blattfarbstofftrennung Aktivität: Hier wird die Bestimmung nach Brockmann-Schodder durchgeführt. Dazu verwendet man verschieden behandelte Platten: 1: Platte im Wasserdampfgesättigten Raum 2: Luftfeuchte Platte 3: 30min Trockenschrank 30min Laborluft 4: 30min Trockenschrank Als Laufmittel verwendet man Tetrachlorkohlenstoff, und als zu trennende Substanzen Azobenzol, 4-Methoxyazobenzol, Sudanrot und 4-Aminoazobenzol. Die so erhaltenen Rf-Werte werden mit einer Tabelle verglichen, und somit der Wassergehalt bestimmt. swertung Blattfarbstoffe Abhängigkeit von der Laufmittelzusammensetzung: Diagramme: Diskussion: Der Theorie nach, müssten bei steigender Polarität, auch die Rf-Werte ansteigen.
Manche Farbstoffe werden vom Kieselgel stärker zurückgehalten, andere schwächer. Das führt zu einem Trenneffekt und das zuvor homogene Gemisch kann in seien Bestandteile zerlegt und analysiert werden. UV/VIS-Spektroskopie: Im UV/VIS-Spektrometer wird Licht mit definierter Wellenlänge auf die Probe gestrahlt und mit einem Detektor gemessen, wie viel davon absorbiert wird. So absorbieren Chlorophyll A und B blaues und rotes Licht, reflektieren aber grünes Licht (weshalb wir Pflanzen als "grün" wahrnehmen). Dünnschichtchromatographie blattfarbstoffe rf west virginia. Aber wie die Dünnschichtchromatographie gezeigt hat, besteht der Blattextrakt nicht nur aus grünem Chlorophyll – auch im UV/VIS-Spektrum kann das Absorbtionsmaximum von beta-Carotin bei 475 nm identifiziert werden. Antwort auf die Eingangsfrage: Warum verfärben sich die Blätter im Herbst? Würde man ein Blatt aus dem Sommer und eines aus dem Herbst vergleichen, würde man sehen, dass die Rf-Werte gleichbleiben – also dieselben Substanzen im Blatt vorkommen. Was sich ändert, ist die Zusammensetzung.
Anschlieend wird die Rohchlorophylllsung mit einer Kapillare strichfrmig etwa 2cm vom unteren Rand entfernt, auf eine DC-Kieselgelplatte aufgetragen. Dieser Vorgang wird mehrmals wiederholt (Zwischentrocknung! ). Zuletzt wird das DC in die mit dem Laufmittel befllte Trennkammer gestellt. Nach ca. 10min, sofern die Laufmittelfront bis kurz vor den oberen Rand der DC-Platte gelaufen ist, wird die Platte aus der Trennkammer heraus genommen und markiert sofort die Laufmittelfront und lsst die Platten endgltig trocknen. Dünnschichtchromatographie blattfarbstoffe rf wert 2. Beobachtung: Das Laufmittel steigt die mit Kieselgel beschichtete DC-Platte hoch und nimmt die verschiedenen Farbstoffe unterschiedlich weit mit. Es bilden sich braune, gelbe, hell- sowie dunkelgrne strichfrmige Farbfronten. Man kann beobachten dass die vorher einfarbige Substanz sich nun in mehrfarbige Komponenten aufgeteilt hat. Ich vermute dass die einzelnen Farbstoffe unterschiedlich weit vom Laufmittel getragen wurden. Erklrung: Das Laufmittel, bestehend aus Benzin, Petrolther und Propanol-2 steigt auf Grund der Kapillarwirkung die mit Kieselgel beschichtete DC-Platte hoch und zieht die im Laufmittel unterschiedlich gut gelsten Bestandteile unterschiedlich weit mit.
Mit steigender Aktivität sinken die Rf-Werte, da immer mehr Adsorptionsplätze vorhanden sind. Als Ausnahme ist Platte 3 zu bemerken. Da stimmen die Ergebnisse nicht mit den Erwartungen überein, da diese Platte wohl nicht lang genug im Ofen war oder an der Luft in Kontakt mit Wasserdampf gekommen ist, und somit ihre Aktivität wieder gesunken ist. Wassergehalt nach Brockmann-Schodder: 1: ca. 6% H2O 2: ca. Chromatographie von Blattfarbstoffen — Chemie - Experimente. 4% H2O 3: ca. 5% H2O 4: <3% H2O
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